咨詢熱線

400-028-6680

當前位置:首頁  >  技術文章  >  臺式低速冷凍離心機提取細胞質和細胞核蛋白離心詳細步驟

臺式低速冷凍離心機提取細胞質和細胞核蛋白離心詳細步驟

更新時間:2021-09-08      點擊次數:3167
   臺式低速冷凍離心機,轉速一般不超過4000r/min,最大容量為2~4L,是實驗室于大量初級分離提取生物大分子、沉淀物等。其轉頭多用鋁合金制的甩平式和角式兩種,離心管有硬質玻璃、聚乙烯硬塑料和不銹鋼管多種型號。離心機裝配有驅動電機、定時器、調整器(速度指示)和制冷系統(溫度可調范圍為-20~+40℃),可根據離心物質所需,更換不同容量和不同型號轉速的轉頭。
  臺式低速冷凍離心機提取細胞質和細胞核蛋白離心詳細步驟:
  1.決定細胞生長狀態,細胞生長狀態應該是80%或者更好:
  2.用離心機以1500r/min離心5min
  3.棄上清液,用等體積的冷PBS洗細胞,像步驟2那樣,反復3次
  4.根據估計的沉淀量加入5倍體積的isotoniclysisbuffer到細胞顆粒中,使細胞溫和懸浮,盡量避免泡沫
  5.加入裂解液lysisbuffer在懸浮的細胞中,并放在冰上15min讓細胞膨脹,可以通過顯微鏡檢查
  6.對于細胞實驗中膨脹的細胞,加入10%的IGEPALCA-630使最后的濃度達到0.3%,混勻,加的時候要溫和
  7.立即離心(量大的可以用1.5ml的EP管,以5500r/min離心30s;量大的可以用50ml的管子以5500r/min離心2min)
  8.轉移上清液(細胞質蛋白)到一個新的冷凍管中
  9.用懸浮顆粒5倍體積的isotoniclysisbuffer懸浮細胞,并混勻
  10.用離心機離心細胞懸浮液,以1500r/min離心5min,移掉上清液
  11.用2/3倍體積的extractionbuffer懸浮顆粒
  12.把管子放置在震蕩混勻器上,以700r/min,15min震蕩混勻,接著以1400r/min,15min,整個過程要仔細,避免泡沫產生
  13.以9400r/min離心15min,低溫離心完后轉移上清液到一個新的冷凍離心管中
  14.分成幾份用液氮冷凍,并且保存起來(長期保存應放在-80℃上,短期保存要放在-20℃上)

聯系我們

四川蜀科儀器有限公司 公司地址:四川省成都市溫江區海旺路99號5號樓   技術支持:化工儀器網
  • 聯系人:曾先生
  • QQ:599353114
  • 公司傳真:028-61985396
  • 郵箱:zls@sklxj.com

掃一掃 更多精彩

微信二維碼

主站蜘蛛池模板: 国产成人一级片| 成人黄色激情视频| 四虎成人精品无码| 亚洲精品成人网站在线观看| 成人免费黄色网址| 成人免费观看高清在线毛片| 成人免费看吃奶视频网站| 国产成人女人在线视频观看 | 777精品成人影院| 成人午夜性a一级毛片美女| 国产成人涩涩涩视频在线观看 | 免费成人av电影| 婷婷国产成人精品视频| 国产成人免费高清视频网址| 久久久久亚洲AV成人网人人网站| 日本成人在线网址| 国产成人精品免费视频大全五级| 91成人试看福利体验区| 国产成人青青热久免费精品| 5g影院欧美成人免费| 噜噜噜亚洲色成人网站| 国产精品成人99一区无码| 精品久久久久久成人AV| 亚洲成人动漫在线| 成人免费网站视频www| 成人黄18免费视频| 日韩国产成人精品视频| 日韩精品成人一区二区三区| 色偷偷成人网免费视频男人的天堂| 免费的成人a视频在线观看| 国产成人无码一区二区三区在线 | 欧美日韩国产成人高清视频| 久久成人免费大片| 亚洲国产成人久久精品app| 亚洲国产成人久久99精品| 亚洲成人黄色在线| 亚洲av无码成人精品区日韩 | 免费视频成人片在线观看| 亚洲精品成人片在线观看精品字幕 | 88aa四虎影成人精品| 欧美成人精品一区二三区在线观看|